人胸腎表達(dá)趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

使用目的：     為定量（性）測(cè)定活化的目標(biāo)濃度的血清，血漿，組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。     如果你有任何問(wèn)題，請(qǐng)聯(lián)系上海義森生物科技有限公司。

實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。 樣本處理及要求1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于2000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8℃ 2000g離心30分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：2000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。Elisa Biotech生產(chǎn)的各項(xiàng)指標(biāo)elisa試劑盒的檢測(cè)范圍適中。經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi)，因此，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 需要而未提供的試劑和器材1. 酶標(biāo)儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱人胸腎表達(dá)趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

試劑盒組成 名稱 96孔配置 48孔配置 備注 微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 無(wú) 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按說(shuō)明書復(fù)溶 樣本稀釋液 10mL 10mL 無(wú) 檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú) 20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說(shuō)明書稀釋 底物A 6mL 3mL 無(wú) 底物B 6mL 3mL 無(wú) 終止液 6mL 3mL 無(wú) 封板膜 2張 2張 無(wú) 說(shuō)明書 1份 1份 無(wú) 自封袋 1個(gè) 1個(gè) 無(wú)

人胸腎表達(dá)趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

注意事項(xiàng)1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。 試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解，使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。 操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4-5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值