用 途:
大鼠E-selectin ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的E-selectin 。本試劑盒可以檢測天然和重組的E-selectin 。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。
試驗原理:
大鼠E-selectin 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知E-selectin 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將E-selectin 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中E-selectin 的濃度呈比例關系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶標板 | 1塊板(96T) | 半塊板(48T) | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標準品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按說明書進行稀稀 |
空白對照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
標準品稀釋緩沖液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素標記的抗E-selectin抗體 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶(60ml) | 1瓶(30ml) | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性,但沒有實驗室可完全保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病,依據(jù)當?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。
2. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
3. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
4. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
400 ng/ml | (6號標準品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
200 ng/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
100 ng/ml | (4號標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
50 ng/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25 ng/ml | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
12.5 ng/ml | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0 ng/ml | (空白對照) | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2. 洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育15分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實驗方案
| 標準品濃度(ng/ml) |
| ||||||||||
A | 400 | 400 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
B | 200 | 200 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
C | 100 | 100 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
D | 50 | 50 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
E | 25 | 25 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
F | 12.5 | 12.5 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
G | 0 | 0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
H | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
結果分析
以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的E-selectin 標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的E-selectin 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
elisa試劑盒可以提供免費代測服務,收到樣本后七個工作日即可提供客戶所需原始數(shù)據(jù)
名稱:馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)ELISA檢測試劑盒
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說明書 提供免費代測
包裝:試劑盒
類別:ELISA試劑盒/馬
保存:2-8℃
有效期:6個月
運貨方式:專門快遞免費送貨
價格:電議
索取說明書或有技術問題請聯(lián)系我們的在線銷售人員!【凡在公司購買ELISA試劑盒的客戶,可享受我司提供的免費代測服務、全程技術指導及中英文雙版說明書;公司還提供完整售后服務,如有問題可聯(lián)系我司銷售人員,我們會以最快的速度為您解決問題!】
馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)ELISA檢測試劑盒
僅供科研使用,不得用于臨床,使用前仔細閱讀說明書。
ELISA試劑盒的標本有血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等。
ELISA試劑盒進口分裝特點:重復性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性。
馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)ELISA檢測試劑盒
操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)ELISA檢測試劑盒人
結果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.1
臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為免疫缺陷。FIV)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為免疫缺陷病(FIV)陽性
全國咨詢熱線:13366469818 15311645696 QQ:1261299569
上海江萊生物科技有限公司專業(yè)供應【綿羊SYCP3ELISA檢測試劑盒】,ELISA試劑盒現(xiàn)貨代測,量大從優(yōu),部分ELISA試劑盒特價銷售。
英文名稱:SheepSYCP3ELISAKit
Elisa試劑盒操作方法:雙抗體夾心法/間接法,比較常用的是雙抗體夾心法。
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇;2.包被抗體(或抗原)的選擇;3.酶標記抗體工作濃度的選擇;4.酶的底物及供氫體的選擇.
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷.
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好.
綿羊SYCP3ELISA檢測試劑盒本公司多年專業(yè)酶免服務,為國內(nèi)最專業(yè)的ELISA試劑盒供應商之一,質(zhì)量保證,價格低,是國家重點實驗室及國內(nèi)各大院校長期指定供應商,本公司實驗室可免費提供代測服務,期待您的來電!
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CAS:114977-28-5,多烯紫杉醇Docetaxel
CAS:29376-68-9,黃花夾竹桃黃酮標準品|對照品
豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒
CAS:3738-70-3,鹽酸吐根酚堿標準品|對照品
兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒
猴子血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA試劑盒
大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒
纖維二糖酶(cellobiase)ELISA試劑盒
人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒
人維生素D(VD)ELISA試劑盒
人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
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糖化血紅蛋白檢測試劑包括四個項目:
1、挪威小旋風糖化血紅蛋白分析儀C-反映蛋白經(jīng)典項目 定量檢測臨床適應癥:♦在醫(yī)學臨床上用于感染創(chuàng)傷、心梗、類風濕性關節(jié)炎等疾病的輔助診斷♦區(qū)分細菌性感染和病毒性感染♦檢測疾病動態(tài)過程♦觀察抗生素藥物治療效果2、挪威小旋風糖化血紅蛋白分析儀HbA1c一滴血樣 檢測糖化臨床應用:♦反映糖尿病患者2-3個月左右的糖代謝情況♦監(jiān)測糖尿病并發(fā)在微細血管病變臨床適應癥:♦輔助鑒別診斷糖尿病♦糖尿病患者用藥療效檢測♦預測糖尿病患者并發(fā)癥的危險程度操作時間:5分鐘3、挪威小旋風糖化血紅蛋白分析儀D-Dimer靈敏 特異性強臨床適應癥:♦靜脈血栓,肺栓塞和動脈血栓塞的診斷♦彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的診斷♦纖溶作用機制的早期檢測—血栓前危♦各種腫瘤及妊娠高癥患者的病情監(jiān)測指標操作時間:3分鐘 4、挪威小旋風糖化血紅蛋白分析儀U-Albumin觀察入微,快速檢測臨床適應癥:♦檢測病人尿液中的低濃度的微量蛋白的體外快速診斷♦高血壓性腎病♦糖尿病性腎病♦用藥療效檢測操作時間:3分鐘
德國拜發(fā)R-Biopharm公司——專業(yè)生產(chǎn)食品安全檢驗試劑盒的公司,產(chǎn)品包括食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測產(chǎn)品;產(chǎn)品還包含有原德國寶靈曼的有關化學物質(zhì)的生物及酶法分析試劑盒。拜法檢測產(chǎn)品廣泛應用于各級檢測實驗室及食品生產(chǎn)企業(yè)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Myc基因肺癌相關蛋白(MYCL)免疫組化試劑盒
MYCL IHC Kit
貨 號:XY9-24627R
中文名稱:Myc基因肺癌相關蛋白(MYCL)免疫組化試劑盒
英文名稱:MYCL IHC Kit
英文別名:l myc protein; l myc 1 proto oncogene; L myc 1 proto-oncogene protein; Myc related gene from lung cancer; MYCL 1; MYCL1; LMYC; BHLHE38; Protein L-Myc-1; oncogene lmyc; v myc avian myelocytomatosis viral oncogene homolog 1 lung carcinoma derived; l-Myc; MYCL1_HUMAN.
應用范圍:Immunohistochemistry
樣本類型:組織切片
保存條件:見下表。有效期 6 個月。
產(chǎn)品規(guī)格: 50T 100T
樣本要求:新鮮活檢樣本組織,中性福爾馬林或多聚甲醛,固定時間 12-48h,參照病理技術規(guī)范要求取材、脫水、石蠟包埋并制成蠟塊,蠟塊在常溫條件下保存有效期有 5 年。組織切片厚度為 3-5μm 并黏附在防脫玻片上,輕拍切片架并用吸水紙吸干組織切片中的水滴,再放入 56-60℃恒溫箱中烘烤 2h 后,從恒溫箱中移出玻片放在溫室下冷卻。如果切片在室溫下(15-28℃)保存,為了良好的重現(xiàn)組織中的抗原分布情況,請于切片制作后 7 天內(nèi)完成檢測。
產(chǎn)品介紹:Cellular DNA-binding proteins encoded by the c-myc genes. They are normally involved in nucleic acid metabolism and in mediating the cellular response to growth factors. Elevated and deregulated (constitutive) expression of c-myc proteins can cause tumorigenesis. The MYCL1 gene encodes a protein which is associated with lung cancer in idiopathic pulmonary fibrosis.
[產(chǎn)品組分及規(guī)格:]
編號 | 組份 | 50T規(guī)格 | 100T規(guī)格 | 儲存 |
1 | PBS 緩沖液(干粉) | 2 L×1袋 | 2 L×2袋 | 室溫 |
2 | 100×檸檬酸鈉抗原修復液 | 16ml | 32ml | 2-8℃ |
3 | 內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑 | 3ml | 5ml | 2-8℃ |
4 | 抗體稀釋液(即用型) | 3ml | 5ml | -20℃ |
5 | MYCL 抗體 | 50ul | 50ul | -20℃ |
6 | 封閉用正常山羊血清工作液(即用型) | 3ml | 5ml | 2-8℃ |
7 | 生物素標記羊抗兔 IgG(即用型) | 3ml | 5ml | 2-8℃ |
8 | 辣根酶標記鏈酶卵白素工作液(即用型) | 3ml | 5ml | 2-8℃ |
9 | DAB kit(20×)顯色液 | 0.3 ml | 0.5ml | -20℃ |
10 | DAB kit(20×)稀釋液 | 0.3 ml | 0.5ml | -20℃ |
11 | 蘇木素染液(即用型) | 4ml | 6ml | 室溫 |
12 | 說明書 | 1 份 | 1 份 |
[石蠟包埋組織的免疫組織化學方案]
實驗操作步驟(以石蠟切片為例)
[儀器、設備:]
移液槍、免疫組化筆、水浴鍋、計時器、孵育濕盒、切片架、蓋玻片、光學顯微鏡、洗瓶等。
[操作步驟]
1. 脫蠟水化。將石蠟切片置于新鮮二甲苯脫中浸泡 15 分鐘,重復三次。去除多余的液體后,依次置于無水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇,各浸泡 5 分鐘,蒸餾水(或自來水)沖洗 5 分鐘。用 PBS 緩沖液(試劑 1,將干粉溶解于 2L 去離子水中)沖洗切片 5 分鐘,重復三次。
2. 抗原修復。將脫蠟水化后的組織切片置于燒杯(或修復盒)中的耐高溫塑料切片架上,加適量修復液 1×檸檬酸鈉抗原修復液(試劑 2,將 100×檸檬酸鈉抗原修復液加去離子水稀釋成 1×檸檬酸鈉抗原修復液),液面要浸過切片組織一定高度,將修復盒置于沸水中煮沸修復 15 分鐘后取出玻片,自然涼至室溫。用 PBS緩沖液沖洗切片 5 分鐘,重復三次。
注意:抗原修復時,修復液務必保證切片始終浸泡在液體內(nèi),一般情況:修復液的量約為 800mL/1 架。
3.阻斷內(nèi)源性過氧化物酶。用吸水紙擦干玻片,免疫組化筆在組織周圍畫圈,滴加 50μL 內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑(試劑 3)到切片組織上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育 30 分鐘,用 PBS 緩沖液沖洗切片 5分鐘,重復三次。
4.血清封閉。用吸水紙擦干玻片,滴加 50μL 正常山羊血清工作液(試劑 5),37℃封閉 20 分鐘,以減少非特異性染色。
5. 一抗孵育。用抗體稀釋液(試劑 4)將一抗原液稀釋成工作液,用吸水紙擦干玻片組織周圍的液體,滴加適量抗體工作液,置于濕盒 4℃孵育過夜或 37℃孵育 1h-2h。
6. 復溫。4℃過夜后從冰箱拿出樣本,在室溫下孵育 15min 復溫(抗體孵育為 4℃過夜選用此步驟,如室溫孵育直接進入下一步清洗)。用 PBS 緩沖液沖洗切片 5 分鐘,重復三次。
7. 二抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加 50μL 生物素標記的羊抗兔 IgG(試劑 6),37℃孵育 20 分鐘,用 PBS緩沖液沖洗切片 5 分鐘,重復三次。
8. 三抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加 50μL 辣根酶標記的鏈酶卵白素孵育(試劑 7),37℃孵育 20 分鐘,用 PBS 緩沖液沖洗切片 5 分鐘,重復三次。
9. 顯色。甩去 PBS 緩沖液,吸水紙擦干切片; 每張切片滴加新鮮配制的 DAB 工作液 50μL(試劑 8:試劑 9:試劑 1=1:1:18 比例配置),孵育 3-5min,光學顯微鏡下觀察染色結果,切勿顯色過深;顯色后用自來水沖洗切片終止顯色。
10. 復染。滴加適量蘇木素染液(試劑 10)復染,孵育 1-5 分鐘,自來水沖洗 5 分鐘,滴加鹽酸酒精分化液分化 30 秒,自來水沖洗。
11. 脫水封片。將玻片依次置于 70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無水乙醇,各浸泡 5 分鐘,再將玻片放入二甲苯中浸泡 15 分鐘,重復三次。玻片取出來稍晾干,用中性樹膠封片。
[結果判斷]
在光學顯微鏡下對染色的切片觀察并判斷。蘇木素染細胞核為藍色,DAB 顯色的陽性表達為棕黃色。
[注意事項]
1. 檢測樣本時需同時做陰性對照和陽性對照,以提高實驗的可靠性,否則結果不可取。
2. 本品中的配套試劑,請不要用其他生產(chǎn)商產(chǎn)品替換使用。
3. DAB 為致癌物質(zhì),請采取必要的防范措施,現(xiàn)用現(xiàn)配。
4. PBS洗滌液(試劑1)配制后在4℃可保存一周;抗原修復液(試劑2)及顯色劑(試劑9和10)的工作液需每次實驗時現(xiàn)用現(xiàn)配。
5. 本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療。
6. 此試劑是否可用于除中性福爾馬林或多聚甲醛之外固定的組織未得到驗證。
僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動物的治療等任何其他用途,不為任何個人提供產(chǎn)品和服務。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。
四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒詳細資料:
四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒實驗目的:用于蜂蜜、牛奶、組織(含水產(chǎn))中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環(huán)素類藥物的殘留檢測。以此監(jiān)測生產(chǎn)出的產(chǎn)品是否超出農(nóng)藥標準
實驗原理:應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。(3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。(五)試劑盒的清洗 試驗原理:試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。自備材料 1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。
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